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          技術文章

          血清質檢方法和重要作用

          更新更新時間:2017-10-09 瀏覽次數(shù):1780

          細胞培養(yǎng)基的構成中動物血清對細胞的生長繁殖起著重要作用。在動物血清中牛血清的應用又是zui廣泛的,所以想要細胞在培養(yǎng)過程中長的好、穩(wěn)定,牛血清的質量好壞直接影響生物研究的質量和安全性,使用質量好的牛血清也是細胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。

                 血清是提供生長激素、營養(yǎng)物,以及低分子營養(yǎng)物;提供結合蛋白;能結合或調變它們所結合的物質活力;是細胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源;起酸堿度緩沖液作用;提供蛋白酶抑制劑;細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受損傷;能與有毒金屬和熱源物質結合,起到解毒作用。

           

           

                血清分類
                胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血
                新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈采血
                小牛血清:出生三月齡小牛動脈采血分離血清
                血清來源
                來自國內非疫區(qū),有說明血清來源的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗結果和交付情況。
                血清收集
                胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個月內)血清靜脈取血。血清在低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存,符合工業(yè)生產(chǎn)的標準。
                血清制備
                1、熱滅活血清(非必須)
                2、γ-射線照射:γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。
                3、除菌過濾:胎牛血清要通過三層100nm過濾。
                血清質檢方法
                ⑴、化學檢測
                A 生化檢測:膽固醇、甘油三酯、膽紅素 、尿素、尿酸、葡萄糖、谷丙轉氨酶、高筒、體  酮、雌二醇等檢測
                B 微量元素檢測:鉀、鈉,鐵、氯化物、鈣、鎂、總鐵結合力、血清唾液酸等檢測
                C 蛋白檢測:白蛋白和球蛋白檢測
                ⑵、微生物檢查
                ①、細菌和真菌:直接培養(yǎng)法
                ②、支原體檢測:培養(yǎng)法,DNA熒光染色
                ③、病毒檢測:直接熒光抗體檢測
                牛蘭舌病毒 Bovin blue tongue;
                牛腺病毒 Bovine Adenovirus;
                牛細小病毒 Bovine Parvovirus;
                牛病毒性腹泄病毒 Bovine Viral Diarhea Virus;
                狂犬病病毒 Rabies;
                呼腸弧病毒 Reovirus;
                牛呼吸道合胞病毒 BRSV;

                副流感病毒Ⅲ型 Parainfluenza。

                工欲善其事必先利其器,所以選擇好的血清也相當?shù)闹匾瑸榱烁玫呐囵B(yǎng)細胞,一定要選擇正規(guī)質量好的血清,不要隨便使用便宜的,導致zui后的科研成果不理想。

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